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| 小鼠三磷酸腺苷（ATP）ELISA試劑盒 |
 品牌：原鑫生物
貨號：YX-137924
規(guī)格：48T/96T
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小鼠三磷酸腺苷（ATP）ELISA試劑盒 檢測原理
小鼠三磷酸腺苷（ATP）ELISA試劑盒檢測原理基于競爭法ELISA。該方法通過加入已知濃度的ATP酶標(biāo)抗原和待測樣本中的ATP，與固定在微孔板上的ATP特異性抗體進行競爭結(jié)合。樣本中ATP濃度越高，則與抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗原越少，反之亦然。經(jīng)過一系列洗滌步驟后，加入酶標(biāo)二抗與酶標(biāo)抗原結(jié)合，最后加入顯色底物進行顯色反應(yīng)。顯色程度與樣本中ATP濃度成反比，通過測定吸光度值，可計算出樣本中ATP的濃度。
檢測步驟詳解
1. 試劑準(zhǔn)備：將試劑盒中的試劑按照說明書要求進行準(zhǔn)備，包括酶標(biāo)抗原、抗體、酶標(biāo)二抗、顯色底物等。
2. 樣本處理：根據(jù)實驗需要，對小鼠樣本進行適當(dāng)處理，如離心、稀釋等，以去除干擾物質(zhì)并調(diào)整樣本濃度。
3. 加樣：將處理好的樣本和已知濃度的ATP酶標(biāo)抗原分別加入微孔板中，每個樣本設(shè)置多個復(fù)孔以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
4. 孵育：將微孔板置于恒溫箱中，進行一定時間的孵育，使抗原與抗體充分結(jié)合。
5. 洗滌：孵育結(jié)束后，用洗滌液洗滌微孔板，去除未結(jié)合的抗原和抗體，以減少非特異性反應(yīng)。
6. 加酶標(biāo)二抗：洗滌后，向微孔板中加入酶標(biāo)二抗，與酶標(biāo)抗原結(jié)合形成抗原-抗體-酶標(biāo)二抗復(fù)合物。
7. 再次孵育：將微孔板再次置于恒溫箱中，進行一定時間的孵育，使酶標(biāo)二抗與抗原-抗體復(fù)合物充分結(jié)合。
8. 洗滌：再次洗滌微孔板，去除未結(jié)合的酶標(biāo)二抗。
9. 加顯色底物：向微孔板中加入顯色底物，與酶標(biāo)二抗中的酶發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生顏色變化。
10. 終止反應(yīng)：當(dāng)顏色變化達到一定程度時，加入終止液終止顯色反應(yīng)。
11. 測定吸光度值：使用酶標(biāo)儀測定微孔板中各孔的吸光度值，記錄數(shù)據(jù)并進行分析。
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400-788-2680
