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小鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒
小鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒
品牌:原鑫生物
貨號:YX-130188
規(guī)格:96T
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 小鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒

檢測原理
      小鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒的檢測原理基于抗原-抗體特異性結(jié)合反應(yīng)。試劑盒中包含ADP特異性抗體、酶標(biāo)二抗、底物溶液等關(guān)鍵組分。檢測過程中,樣本中的ADP與包被在微孔板上的ADP特異性抗體結(jié)合,形成抗原-抗體復(fù)合物。隨后,加入酶標(biāo)二抗,與已結(jié)合的ADP-抗體復(fù)合物進(jìn)一步結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。最后,加入底物溶液,酶催化底物發(fā)生顏色反應(yīng),其顏色的深淺與樣本中ADP的含量成正比。通過測量顏色反應(yīng)的強(qiáng)度,可以定量檢測樣本中ADP的濃度。

操作過程
1. 樣本準(zhǔn)備:根據(jù)試劑盒說明書,收集小鼠血液、組織勻漿等樣本,并按照要求處理以獲取待測溶液。
2. 試劑準(zhǔn)備:取出試劑盒中的微孔板、ADP特異性抗體、酶標(biāo)二抗、底物溶液等試劑,按照說明書要求進(jìn)行準(zhǔn)備。
3. 加樣:將待測溶液和已知濃度的ADP標(biāo)準(zhǔn)品加入微孔板中,每孔加入等量的ADP特異性抗體,混勻后靜置反應(yīng)一定時(shí)間。
4. 洗滌:用洗滌液洗滌微孔板,去除未結(jié)合的抗體和雜質(zhì),重復(fù)洗滌數(shù)次。
5. 加酶標(biāo)二抗:向每個(gè)孔中加入酶標(biāo)二抗,混勻后靜置反應(yīng)一定時(shí)間。

6. 再次洗滌:用洗滌液再次洗滌微孔板,去除未結(jié)合的酶標(biāo)二抗和雜質(zhì)。
7. 顯色:向每個(gè)孔中加入底物溶液,酶催化底物發(fā)生顏色反應(yīng),靜置顯色一定時(shí)間。
8. 終止反應(yīng):加入終止液,停止顏色反應(yīng)。
9. 測量:使用酶標(biāo)儀測量每個(gè)孔的顏色反應(yīng)強(qiáng)度(吸光度),記錄數(shù)據(jù)。
10. 結(jié)果分析:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,將待測溶液的吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,計(jì)算出樣本中ADP的濃度。


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