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| 血清素/5-羥色胺(ST/5-HT)elisa試劑盒 |
 品牌：原鑫生物
貨號(hào)：YX-XQ-Q22154
規(guī)格：48T/96T
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血清素/5-羥色胺(ST/5-HT)elisa試劑盒 
血清素/5-羥色胺(ST/5-HT)elisa試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA法。用ST/5-HT抗原包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的ST/5-HT與包被的ST/5-HT競(jìng)爭(zhēng)生物素標(biāo)記的抗ST/5-HT單抗上的結(jié)合位點(diǎn)，游離的成分被洗去。加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值，ST/5-HT濃度與OD450值之間呈反比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中ST/5-HT的濃度。
血清素/5-羥色胺(ST/5-HT)elisa試劑盒方法： 我們測(cè)量了來自 Kras G12D/+ /Trp53 R172H/+ 的胰腺中調(diào)節(jié) 5-HT 合成、包裝和降解的蛋白質(zhì)水平/Pdx1-Cre (KPC) 小鼠，它們會(huì)發(fā)生胰腺腫瘤，以及 PDAC 細(xì)胞系和包含 81 個(gè)人類 PDAC 樣本的組織微陣列。我們還通過對(duì)包含 311 個(gè) PDAC 樣本的組織微陣列的免疫組織化學(xué)分析，分析了參與 5-HT 合成和降解的蛋白質(zhì)的表達(dá)水平，以及與患者存活時(shí)間相關(guān)的表達(dá)水平。通過ELISA分析14個(gè)匹配的PDAC腫瘤和非腫瘤組織中的5-HT水平。PDAC細(xì)胞系與5-HT一起溫育并測(cè)量細(xì)胞存活和細(xì)胞凋亡。我們分析了 PDAC 細(xì)胞中 5-HT 受體 HTR2B 的表達(dá)以及受體激動(dòng)劑和拮抗劑的影響，以及小發(fā)夾 RNA 的 HTR2B 敲低。我們確定了 5-HT 刺激對(duì) BxPC-3 細(xì)胞基因表達(dá)譜的影響。通過免疫熒光和免疫沉淀分析以及通過測(cè)定細(xì)胞外酸比、葡萄糖消耗和乳酸產(chǎn)生來評(píng)估通過 HTR2B 的 5-HT 信號(hào)傳導(dǎo)對(duì)糖酵解的調(diào)節(jié)。原代 PDAC，無論是否暴露于 SB204741（HTR2B 的選擇性拮抗劑），在小鼠體內(nèi)作為異種移植腫瘤生長(zhǎng)，并將 SB204741 施用于荷瘤 KPC 小鼠；通過成像分析測(cè)量腫瘤生長(zhǎng)和代謝。
血清素/5-羥色胺(ST/5-HT)elisa試劑盒結(jié)果： 在 PDAC 標(biāo)本的組織微陣列的免疫組織化學(xué)分析中，調(diào)節(jié) 5-HT 合成和降解的 TPH1 水平升高和 MAOA 水平降低，與 PDAC 的階段和大小以及較短的患者存活時(shí)間相關(guān)。我們發(fā)現(xiàn)與非腫瘤胰腺組織相比，人類 PDAC 組織中的 5-HT 水平增加，與非轉(zhuǎn)化胰腺細(xì)胞相比，PDAC 細(xì)胞系中的 5-HT 水平增加。PDAC 細(xì)胞系與 5-HT 的孵育增加了增殖并阻止了細(xì)胞凋亡。HTR2B 的激動(dòng)劑，而不是其他 5-HT 受體，可促進(jìn) PDAC 細(xì)胞的增殖并阻止其凋亡。在 PDAC 細(xì)胞中敲除 HTR2B，或?qū)⒓?xì)胞與 HTR2B 抑制劑一起孵育，減少了它們作為小鼠異種移植腫瘤的生長(zhǎng)。我們觀察到 PDAC 細(xì)胞中 5-HT 和糖酵解通量之間的相關(guān)性；在 5-HT 刺激后，PDAC 細(xì)胞中參與糖酵解、磷酸戊糖途徑和己糖胺生物合成途徑的代謝酶水平顯著增加。5-HT 刺激導(dǎo)致 HTR2B-LYN-p85 復(fù)合物的形成，該復(fù)合物通過增加 MYC 和 HIF1A 的蛋白質(zhì)水平來增加 PI3K-Akt-mTOR 信號(hào)傳導(dǎo)和 Warburg 效應(yīng)。向 KPC 小鼠施用 SB204741 減緩了已建立的胰腺腫瘤的生長(zhǎng)和代謝，并延長(zhǎng)了小鼠的存活期。
血清素/5-羥色胺(ST/5-HT)elisa試劑盒:http://www.sxxtj.cn/products-492.html
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